在細(xì)胞觀察實(shí)驗(yàn)中,常常需要找回之前觀察過(guò)的某個(gè)細(xì)胞。
常規(guī)方法:初步觀察找到感興趣的細(xì)胞,用記號(hào)筆在培養(yǎng)皿/板的底部畫(huà)個(gè)圈。下次再觀察的時(shí)候,根據(jù)記號(hào),再在顯微鏡下尋找之前的細(xì)胞。
缺點(diǎn):
1.由于底部記號(hào)筆的標(biāo)記,使得成像照片上有陰影;
2.想直接觀測(cè)目標(biāo)細(xì)胞的免疫熒光結(jié)果,卻因?yàn)榕囵B(yǎng)皿/板底部的顯微成像效果不理想,而無(wú)法得到好的免疫熒光成像。
現(xiàn)在分享一種好方法,讓大家輕松找回原來(lái)看過(guò)的細(xì)胞!
目的:找回之前觀察過(guò)的細(xì)胞
耗材:帶計(jì)數(shù)格培養(yǎng)皿(品牌:ibidi,總代:雷萌生物)
圖1 培養(yǎng)皿底部帶計(jì)數(shù)格坐標(biāo)
圖2 培養(yǎng)皿底部計(jì)數(shù)格的示意圖
步驟:找到感興趣的細(xì)胞后,記下細(xì)胞的坐標(biāo)信息(橫坐標(biāo)是字母,縱坐標(biāo)是數(shù)字),下次再觀察時(shí),根據(jù)坐標(biāo)信息找到細(xì)胞的位置,即可繼續(xù)觀察同一個(gè)細(xì)胞。
拓展應(yīng)用:
1.底部的計(jì)數(shù)格可直接用于細(xì)胞計(jì)數(shù),計(jì)數(shù)細(xì)胞無(wú)需轉(zhuǎn)移到計(jì)數(shù)板了;
圖3 邊長(zhǎng)500微米的計(jì)數(shù)格
圖4 邊長(zhǎng)50微米的計(jì)數(shù)格
2.鎖定感興趣的細(xì)胞,直接在培養(yǎng)皿里做免疫熒光實(shí)驗(yàn)
圖5 小鼠免疫熒光染色效果(使用ibidi 35毫米培養(yǎng)皿的實(shí)驗(yàn)效果)
如何選擇不同規(guī)格的計(jì)數(shù)格培養(yǎng)皿/載玻片?
根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康膩?lái)!
*指倒置熒光顯微鏡,共聚焦顯微鏡等顯微鏡
**使用玻璃底的產(chǎn)品還可以有配套的蓋子進(jìn)行DIC活細(xì)胞成像